Etude sur les propriétès anti-listéria monocytogénes de la fumée légère AFS

PRODUIT AMCAN AFS-LMC (1ère partie)

Essais de mesure d’inhibition de germes par l’extrait de fumée AFS-LMC

Préambule :

L’étude qui suit met en oeuvre une technique de mesure de surface d’inhibition par diffusion de l’extrait à tester (dont les deux formules commercialisables d’AFS-LMC, FFO et FFN) sur une gélose nutritive tapissée du germe à inhiber. ( Commentaires par Karine GODIN-SERRANO )

A) MATERIELS & METHODES :

Deux milieux de culture différents ont été utilisés :

Le milieu PCA et le milieu Gélose Nutritive.

La composition précise de ces milieux peut vous être communiquée sur demande.

Souches ensemencées et charge des tapis bactériens :

Deux souches non pathogènes : Escherichia Coli (E. Coli N°CIP 76.24 – lot 561) et Listeria innocua (N°CIP 80.11T – lot 763).

Solution étalée (0,1 ml de solution mère) :

E. Coli 4,8 105 UFC/surface de la gélose

Listeria innocua 106 à 107 UFC/surface de la Gélose

Les produits testés (dont les deux formules commercialisables d’AFS-LMC) :

Un témoin d’eau physiologique ............................................pH 6,32

Un témoin d’eau physiologique + HCl ..................................pH 2 à 2,5

AFS-LMC référence 00J25 / FFO ......................................pH 2,24

AFS-LMC référence 00J26 / FFN ......................................pH 2,13

Lactate de sodium à 60% .....................................................pH 8,13

Lactate de potassium à 60% .................................................pH 6,94

Acétate de sodium en solution dans l’eau osmosée à 0,3% ....pH 7,39

Les tests réalisés :

1) Suivi de l’inhibition des cultures ensemencées selon les différents produits testés :

Les différents produits à tester sont absorbés par un tampon de cellulose de calibre standardisé, puis apposés sur la surface des géloses ensemencées et séchées (E.Coli ou Listeria innocua). Ces géloses sont incubées à 30°C pendant plusieurs jours. Le suivi des diamètres d’inhibition est réalisé à 24 – 48 – 72 et 168 heures. Ces relevés sont transcris en surfaces d’inhibition auxquelles sont retranchées la surface du tampon.

Des courbes « surface d’inhibition en cm² = f(heures) » sont tracées.

2) Influence de la dilution de l’AFS-LMC :

Le protocole est le même que celui décrit ci-dessus, mais uniquement pour les dilutions suivantes des produits AFS-LMC : Produit pur – 1/5 – 1/10 – 1/50 et 1/100.

Les Contrôles & Analyses :

Ils concernent uniquement la mesure journalière des diamètres d’inhibition.

B ) RESULTATS :

1) Suivi de l’inhibition des cultures ensemencées :

a. Inhibition de Escherichia Coli :

Interprétation des Résultats :

On observe un très bon comportement des AFS-LMC (inhibition AFS-LMC FFN > AFS-LMC FFO). De plus, le témoin eau physiologique + HCl ayant le même pH que les produits AFS-LMC, on prouve que l’effet des AFS-LMC n’est pas un effet pH, mais bien un effet composition du produit.

On note que l’importance de l’inhibition dépend du milieu de culture (inhibition sur PCA > GN).

L’inhibition par les lactates est nettement moins bonne que les AFS-LMC et de plus courte durée (24 à 48 heures).

b. Inhibition de Listeria innocua :

Interprétation des Résultats :

Même remarques que précédemment, avec un effet inhibiteur encore plus marqué pour les AFS-LMC sur la Listeria par rapport à E.Coli.

Moins de différence entre AFS-LMC FFO et FFN, même si AFS-LMC FFN donne de meilleurs résultats, avec une augmentation de l’inhibition en fonction du temps, à l’inverse des solutions lactates.

La spécificité « Listeria » des produits AFS-LMC semble bien marquée.

2) Influence de la dilution des produits AFS-LMC :

a. Inhibition de Escherichia Coli :

Interprétation des Résultats :

Très forte décroissance de l’inhibition en fonction des dilutions des produits AFS-LMC.

De toute évidence le facteur de dilution ne peut être élevé, il faudrait revoir de façon plus précise ce facteur entre la solution pure et la dilution au 1/5.

Les différences entre GN et PCA restent les mêmes que précédemment.

Il faut noter une décroissance forte également lors du passage de 24 à 48 heures, au-delà cette décroissance n’existe plus, quelles que soient les dilutions.

Il est donc préférable d’utiliser une solution pure d’AFS-LMC.

b. Inhibition de Listeria innocua :

Même remarques que précédemment. L’efficacité des AFS-LMC reste beaucoup plus marquée sur milieu PCA que milieu GN (3 fois plus). On confirme que cette efficacité est fortement dépendante de la richesse du milieu et de sa composition.

CONCLUSIONS :

- Efficacité en inhibition des germes Listeria innocua et E. Coli des produits AFS-LMC,

- Efficacité supérieure de l’AFS-LMC FFN sur l’AFS-LMC FFO,

- Spécificité plus grande des produits AFS-LMC sur l’inhibition des germes Listeria innocua,

- Efficacité des AFS-LMC non liée à leur faible pH mais à leur composition chimique,

- Nécessité d’utiliser les AFS-LMC sous forme pure ou très peu diluée pour une efficacité optimum,

- Inefficacité relative des autres produits inhibiteurs de type acides organiques dans les conditions de cette expérimentation.

AFS LMC : Fiche Technique & Spécifications

Une Nouvelle étude - ( # 2 ) sur des lardons contaminés par des souches de " LISTERIA -MONOCYTOGENES " - vient d'être réalisée.

Pour en prendre connaissance, Cliquez ICI

Au vu de ces résultats, si vous souhaitez améliorer significativement la qualité sanitaire de vos produits , notre équipe commerciale est à votre disposition pour vous fournir des informations complémentaires, ainsi que pour vous aider à la réalisation d’essais pré-industriels.

Karine SERRANO, Février 2001